文章摘要
田 雨;陈其玲;刘树文;何 玲.耐酸与酸敏酒酒球菌环丙烷脂肪酸合酶基因的差异[J].中国食品学报,2019,19(7):64-71
耐酸与酸敏酒酒球菌环丙烷脂肪酸合酶基因的差异
  
DOI:
中文关键词: 酒酒球菌  耐酸性  环丙烷脂肪酸基因  外源表达
英文关键词: 
基金项目:宁夏回族自治区科技重大专项(2016BZ0603);“十三五”国家重点研发计划项目(2016YFD 0400504-01);国家现代农业(葡萄)产业技术体系建设专项(CARS-29-jg-03)
作者单位
田 雨;陈其玲;刘树文;何 玲 西北农林科技大学葡萄酒学院陕西杨凌712100陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心陕西杨凌712100西北农林科技大学合阳葡萄试验示范站陕西渭南715300西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100 
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中文摘要:
      目的:研究筛选得到的野生耐酸与酸敏酒酒球菌环丙烷脂肪酸基因(cfa)的差异,探索酒酒球菌环丙烷脂肪酸基因与酒酒球菌耐酸性的相关性。方法:35株野生酒酒球菌中,利用酸胁迫环境筛选耐酸能力最强的菌株,并与野生酸敏菌SX-1b及实验室离子注入诱变的耐酸、酸敏突变菌a3、b2共同进行环丙烷脂肪酸基因cfa的克隆、测序和比对;选择存在氨基酸突变的野生耐酸酒酒球菌及野生酸敏菌株的cfa基因在植物乳杆菌ATCC33222中进行外源表达,从而验证耐酸菌株cfa基因与耐酸能力的相关性。结果:(1)筛选出野生型耐酸酒酒球菌CS-7b和ME-5b,确定其耐酸生长极限为pH 2.6;(2)对野生菌与诱变菌的cfa基因进行测序比对发现,耐酸菌株的野生型和诱变型的序列相同,较酒酒球菌PSU-1发生3处碱基突变,而酸敏菌野生型、诱变型的序列则与酒酒球菌PSU-1一致;(3)将SX-1b与CS-7b的cfa基因在植物乳杆菌中表达,构建重组载体pMG36e-cfa1和pMG36e-cfa2,并得到对应重组菌L1和L2;(4)在pH 3.6培养基中培养,重组菌L1和L2的生长情况明显优于含空载体的植物乳杆菌L0,且L2的生长优于L1。而在pH 3.4培养基中培养,L0没有生长迹象,只有重组菌L1和L2正常生长,cfa基因的导入突破了植物乳杆菌宿主菌的生长极限。结论:酒酒球菌cfa基因及基因间存在的稳定差异与菌株耐酸表型具有一定相关性。
英文摘要:
      
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