文章摘要
李 栋;林俊芳;刘 聪;叶志伟;郭丽琼;云 帆;康林芝.蛹虫草类胡萝卜素双加氧裂解酶基因的克隆及表达分析[J].中国食品学报,2019,19(7):215-220
蛹虫草类胡萝卜素双加氧裂解酶基因的克隆及表达分析
  
DOI:
中文关键词: 蛹虫草  类胡萝卜素  类胡萝卜素双加氧裂解酶  生物信息学分析  实时荧光PCR
英文关键词: 
基金项目:广东省科技厅项目(2014B020205003);国家自然科学基金项目(31372116,31572178)
作者单位
李 栋;林俊芳;刘 聪;叶志伟;郭丽琼;云 帆;康林芝 华南农业大学食品学院 食品生物技术研究所广州510642广东省微生态制剂工程技术研究中心广州510642广州市澳键丰泽生物科技股份有限公司广州510760 
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中文摘要:
      目的:类胡萝卜素双加氧裂解酶(CCD)是类胡萝卜素生物合成途径中的一个关键酶。旨在鉴定并克隆蛹虫草中的CCD酶,通过相关生物信息学分析和荧光定量PCR探究其结构、功能聚类以及表达调控。方法:用GenBank登录的CCD酶基因序列与蛹虫草基因组比对,在保守区域设计1对引物,以蛹虫草基因组的DNA为模板对CCD酶基因进行扩增,扩增产物命名为car-TC。car-TC基因连接载体后由生物公司测序;序列通过多种生物信息学软件和在线工具分析;表达量随生长情况的变化关系通过实时荧光定量PCR进行测定。结果:克隆了car-TC基因,该基因长1 784 bp,编码一个577aa的蛋白质,该蛋白质含有CCD酶活性必需的4个组氨酸残基,系统发育进化分析表明该蛋白和棒束菌、白僵菌的同源蛋白聚在同一簇,实时荧光定量PCR结果表明该蛋白的表达量随生长时间的延长而减少。结论:获得一个类胡萝卜素合成途径中的关键酶——双加氧裂解酶基因car-TC,该基因的表达主要受时序调控,随生活周期的进行有逐渐降低的趋势。
英文摘要:
      
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