通过单因素试验和响应面综合试验,确定枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ls-02发酵生产松仁多肽的最佳发酵条件,即:接种量1%,40目松仁蛋白粉,底物含量10%,初始pH6.7,装液量100mL/500mL三角瓶,培养温度34.1℃,搅拌转速110r/min.发酵时间48.6h,在此条件下肽的最大得率为73.6%.对所得松仁肽进行初步的分离纯化,经截留分子质量10 kDa的中空纤维柱超滤,得分子质量10kDa左右的超滤液,其回收率为89.7%.超滤液经SephadexG-25柱分离纯化及相对分子质量分布的测定,共洗脱出4个峰,其各级分的分子质量分别为5 000 Da以上、1 819、575和239 Da.