目的:建立快速检测沙门氏菌、无乳链球菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR方法。方法:根据沙门氏菌(Salmonella)组氨酸转运操纵子基因、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的STRA-Agl-23-1D基因和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的耐热核酸酶nuc基因分别设计引物,进行PCR扩增及反应条件的优化,建立这3种菌的多重PCR检测方法。结果:通过建立多重PCR方法,3对引物同时特异性地扩增出495 bp、360 bp和279 bp目的片段;3种菌的检测限:沙门氏菌1.9×102 cfu/mL、无乳链球菌2.0×102 cfu/mL、金黄色葡萄球菌2.9×102 cfu/mL;3种菌DNA含量的(最低)检出限分别为3.86、25.5、3.47pg。结论:本文建立的多重PCR检测方法,简单、快速、灵敏度高,具有很好的应用前景。