摘要:2009年我国《食品安全法》颁布实施以来,围绕食品安全风险评估制度的实施,在食品安全风险评估机构建设、制度建设、评估的项目、基础数据库建设等方面开展了大量的工作,食品安全风险评估工作取得初步成效。风险评估在食品安全标准制定,食品安全监管,突发事件应急处置及风险交流中发挥了重要作用。

摘要:目的:研究苦瓜冻干超微粉(BLSP)对营养型肥胖大鼠胰岛素抵抗的调节作用及其机制。方法:通过饲喂高脂饲料的方法建立营养型肥胖模型大鼠,分别灌胃BLSP[200,400 mg/(kg bw)]、吡格列酮[10 mg/(kg bw)]和水[4 mL/(kg bw)]4周后,测定其糖耐量、血清胰岛素、血脂水平等指标。结果:与肥胖模型组相比,BLSP能显著减缓肥胖大鼠体重的增速,增加其糖耐量,降低血清胰岛素、甘油三酯和总胆固醇含量,减缓肝脏脂变,其效果优于吡格列酮。结论:BLSP具有改善营养型肥胖大鼠的胰岛素抵抗症状和保护肝脏的作用。其作用机制可能与促进外周组织吸收利用葡萄糖,减弱脂肪细胞甘油三酯的水解和增加肝脏LPL和HL活性有关。

摘要:目的:研究不同饱和度脂肪酸甾醇酯的降脂活性及其在低芥酸菜籽油中的氧化稳定性。方法:以油酸甾醇酯、亚油酸甾醇酯、α-亚麻酸甾醇酯和混合脂肪酸甾醇为试材,采用金黄地鼠高脂模型研究其降脂活性。通过测定氧化诱导时间和氧化起始温度研究4种甾醇酯在低芥酸菜籽油中的氧化稳定性,比较脂溶性茶多酚、迷迭香提取物、抗坏血酸棕榈酸酯3种天然抗氧化剂对强化体系的抑制氧化效果。结果:油酸甾醇酯、亚油酸甾醇酯、α-亚麻酸甾醇酯和混合脂肪酸甾醇4种甾醇酯中以亚油酸甾醇酯和α-亚麻酸甾醇酯最为显著,添加到低芥酸菜籽油中能导致油脂氧化诱导时间减少,氧化起始温度降低,其降低幅度与连接在甾醇酯上脂肪酸的不饱和双键数呈正比;添加脂溶性茶多酚、抗坏血酸棕榈酸酯、迷迭香提取物等天然抗氧化剂能有效缓解氧化过程,其中脂溶性茶多酚效果最为显著。结论:连接在甾醇酯上脂肪酸的不饱和双键数对其降脂活性和氧化稳定性均能产生显著影响。

摘要:从干预细胞氧化应激的角度,采用比色法、荧光检测及免疫分析的方法,考察不同浓度的矢车菊-3-葡萄糖苷对环氧丙酰胺引起的人类乳癌细胞MDA-MB-231毒性的影响。试验结果表明,与环氧丙酰胺单独处理的细胞相比,矢车菊-3-葡萄糖苷预处理后能明显提高细胞存活率,显著降低细胞内活性氧和丙二醛的生成量,而且抑制细胞内还原型谷胱甘肽含量的下降,提高γ-GCS蛋白表达量。矢车菊-3-葡萄糖苷能够保护MDA-MB-231细胞免受环氧丙酰胺引起的氧化应激。

摘要:目的:研究芦笋多糖对肿瘤小鼠红细胞离子通道活性的影响。方法:建立了肿瘤动物模型,分高、中、低剂量腹腔给予芦笋多糖7 d,采集并制备红细胞悬液,用试剂盒结合分光光度计测定肿瘤小鼠红细胞膜Na+,K+-ATPase、Ca2+,Mg2+-ATPase活性,采用Fluo-3/AM、MQAE、BCECF-AM荧光探针染色,使用激光共聚焦显微镜和荧光分光光度计分别测定小鼠红细胞内[Ca2+]、[CI-]、[H+]浓度的变化。结果:芦笋多糖能升高肿瘤小鼠红细胞膜Na+,K+-ATPase、Ca2+,Mg2+-ATPase活性,降低肿瘤小鼠红细胞内[Ca2+]浓度,增强红细胞阳离子通道转运活性。芦笋多糖能够降低肿瘤小鼠红细胞内[CI-]浓度,增强红细胞阴离子通道转运活性。芦笋多糖还能够降低肿瘤小鼠红细胞内的[H+]浓度,升高红细胞内pH,维持红细胞酸碱平衡。结论:芦笋多糖通过提高肿瘤小鼠红细胞膜离子通道的功能,稳定细胞内环境,从而有助于保护红细胞膜结构,维持红细胞发挥正常功能。

摘要:为提高豆豉纤溶酶口服生物利用度,建立了豆豉纤溶酶载纳米脂质体系统,并对其表征进行评价。采用硫酸铵梯度法制备的豆豉纤溶酶纳米脂质体的包封率为(52.74±4.24)%,粒径(72.04±31.2)nm,平均Zeta电位-44.2 mV,PdI 0.237。试验结果表明:豆豉纤溶酶纳米脂质体在体外稳定性好,在人工肠液中的释放符合一级动力学释放规律,豆豉纤溶酶在12 h后释放接近完全,无突释现象。豆豉纤溶酶及载酶纳米脂质体肠吸收液酶活性测定结果表明:豆豉纤溶酶及其载酶纳米脂质体在小肠均有吸收,吸收后仍具有纤溶活性。纳米脂质体可有效促进豆豉纤溶酶的吸收。

摘要:为获得由大肠杆菌内源性IS1序列插入胸腺嘧啶合成酶基因thyA而产生的胸腺嘧啶营养缺陷型的菌株,利用4%的葡萄糖和1.25μg/mL链霉素的培养基提高IS1的插入频率,以三甲氧苄胺嘧啶(TMP)法定向筛选thyA缺陷型菌株。通过PCR扩增与DNA测序分析突变基因的结构;测定thyA缺陷型菌株在含或不含胸腺嘧啶的基础培养基上的生长曲线以研究其生长特性;转化大肠杆菌-乳酸菌穿梭载体衍生的含外源thyA基因的互补质粒pMG36e-thyA,采用抗生素抗性基因与质粒上互补的thyA基因两种方法筛选转化子,检测突变菌株在基础培养基上的恢复生长情况。诱导增加IS1的转座频率后,以含3μg/mL的TMP的GSCTt筛选培养基得到thyA缺陷型菌株,将该菌株命名为D8。PCR扩增结果显示,该突变株的thyA基因比正常基因长约800bp,测序结果显示该基因内部插入了完整的IS1序列。D8菌株需依赖外源胸腺嘧啶才能在基础培养基上生长,当转化入pMG36e-thyA后,可利用质粒上的互补基因恢复在基础培养基上的生长性能。大肠杆菌内源性插入序列IS1可插入thyA内部使该基因沉默,为利用内源性插入序列构建缺陷型菌株提供了科学基础。

摘要:牛肉风味强化肽是1种从牛肉木瓜蛋白酶的水解物中分离得到的风味强化八肽。为了提供能够大量且廉价得到这种小肽物质的表达基因,本实验室工作人员构建以甲醇为诱导物并带有16拷贝BMP基因的表达载体pPIC9-16BMP。本文为了提高食品的安全性,避免甲醇作为诱导物,探索用GAP启动子(PGAP)取代AOX1启动子(PAOX1),在毕赤酵母中组成型表达外源蛋白的可能性。应用PCR方法从毕赤酵母染色体中扩增GAP启动子,以其取代诱导型表达载体pPIC9-16BMP上的PAOX1,构建了组成型表达载体pGAP9-16BMP。转化毕赤酵母GS115,对获得的高拷贝转化子毕赤酵母GS115(pGAP9-16BMP)进行组成型表达,并用SDS-PAGE检测到目的产物。

摘要:研究了金枪鱼鱼油分子蒸馏前期乙酯化反应体系中各脂肪酸的氧化规律,并对分子蒸馏富集鱼油中多不饱和脂肪酸的工艺进行研究。利用GC-MS联用分析仪测定酯化时间6 h内脂肪酸的变化,并用分子蒸馏对乙酯化产物中ω-3脂肪酸进行富集。试验结果表明:在乙酯化反应体系中,多不饱和脂肪酸在前4 h下降缓慢,其含量下降小于40%,4 h后下降明显,其中C20∶3(n-3)含量下降尤为明显,超过60%;单不饱和脂肪酸的下降速率不明显,在整个反应过程中,其含量下降基本小于30%。此外,采用美国POPE2英寸刮膜式蒸馏设备,在110℃,5 Pa,进料流量为4 mL/min时对鱼油ω-3脂肪酸富集效果最好。鱼油乙酯化反应体系中,单不饱和脂肪酸氧化程度受反应时间影响不明显,反应时间对多不饱和脂肪酸的氧化程度有明显的促进作用。在此基础上,通过3级分子蒸馏,可以得到总ω-3脂肪酸含量为70.78%,得率为10.1%的鱼油乙酯。

摘要:研究压热法制备淮山药抗性淀粉的影响因素与抗性淀粉得率的关系,采用三因素二次通用旋转组合设计,优化淮山药抗性淀粉的制备工艺,试验结果表明:淀粉乳含量、pH值、压热时间对抗性淀粉得率的影响极显著,影响因素主次顺序依次为淀粉乳含量、淀粉乳pH值和压热时间;最佳工艺条件为淀粉乳含量25.20%,pH6.26,压热时间42.85 min,在此条件下测得的淮山药抗性淀粉得率为25.27%。In-Vitro体外模拟人体消化的试验表明,淮山药抗性淀粉较淮山药原淀粉更难消化,且抗性淀粉含量越大越难以消化。

摘要:以鱼油为芯材,明胶、桃胶为壁材,采用复合凝聚法制备凝胶化的鱼油微胶囊,并研究复合凝聚凝胶化鱼油微胶囊在不同环境条件下的氧化稳定性。试验结果表明:复合凝聚凝胶化鱼油微胶囊在冻结条件下具有较好的氧化稳定性,冷冻不会破坏该微胶囊的结构;pH值对鱼油微胶囊的氧化稳定性影响不大;微胶囊经紫外光照射120 min后,POV值由16.4 meq/kg迅速增至25.5 meq/kg;添加VE可以提高复合凝聚凝胶化鱼油微胶囊的氧化稳定性。

摘要:以凡纳滨对虾为对象,利用拉曼光谱技术研究加热过程中肌肉蛋白二级结构变化对品质特征的影响。研究结果表明:在加热过程中凡纳滨对虾二级结构发生了较大变化,导致质构特性及失水率发生相应的变化。在加热初始阶段30s时,凡纳滨对虾虾肉失水率为0.72%。随着加热时间的延长,失水率快速增加,10 min时达14.8%;同时虾肉质构指标也发生明显变化,即:硬度由初始的991.7848 N增至2 167.7830 N,最后降至1 768.9260 N;弹性由1.1805增至1.3131,再减至1.3088;黏性由7.6197 Pa·s减至1.6068 Pa·s,又增至3.2155 Pa·s;而内聚性、胶黏性、回复性、耐咀性均呈先生高后略微降低的趋势。这可能与虾肉蛋白加热过程中二级结构发生构象变化密切相关,其中α螺旋由新鲜的23.14%降至18.64%,β-折叠含量由23.91%升至29.51%,无规卷曲结构由31.80%升至33.91%。

摘要:结合脂肪氧化和鱼肉色泽指标,观察蓝鳍金枪鱼赤身肉、中腹肉和大腹肉在低温冻藏条件(-18℃)下的变化情况,并对各指标进行相关性分析。结果显示:随着冻藏时间的延长,3个部位肌肉的TBA值和metMb%(高铁肌红蛋白含量)增加;a*值、总色素含量和感官评定值都呈下降趋势;大腹肉变色最快,中腹肉次之,赤身肉最不明显;metMb%与a*值呈极显著负相关(R=-0.943,P<0.01),与TBA值呈极显著正相关(R=0.914,P<0.01)。分析认为蓝鳍金枪鱼各部位肌肉虽都有褐变的趋势,但速率不同,脂肪含量越高的部位褐变越快;若要保证金枪鱼鱼肉的色泽,必须采取措施防止脂肪氧化和高铁肌红蛋白的产生。

摘要:分析了4℃贮藏期间鲣鱼普通肉和暗色肉色素物质及脂质的氧化情况。试验结果表明:暗色肉的总色素物质、血红素铁、高铁肌红蛋白含量(metMb%)以及红度值明显高于普通肉,暗色肉的氧化程度也明显高于普通肉。两种肌肉的总色素含量在第2天达到最大值,分别为968.6,121.6 mg/(kg肉)。metMb%主要呈上升趋势,暗色肉在第12～15天metMb%明显下降(P<0.05)。两种肌肉肌红蛋白粗提液在波长350～750 nm范围的扫描结果表明:在波长410 nm处发生蓝移现象,氧合肌红蛋白特征吸收峰(536 nm和575 nm波长处)逐渐消失,高铁肌红蛋白特征吸收峰(500 nm和630 nm波长处)逐渐出现。暗色肉和普通肉的PV值逐渐增加,分别在第12天和第9天达到最大值,为368、185.8μmol过氧化氢异丙苯/(kg肉),随后呈下降趋势;两种肌肉的硫代巴比妥酸反应产物值逐渐增加,后期增加量较为显著。

摘要:以微生物、理化和感官为指标,对大菱鲆在-2℃微冻贮藏过程中的品质变化进行了研究。试验结果表明,大菱鲆在-2℃贮藏时其货架期可达到20 d。货架期终点时菌落总数为5.99 ln(CFU/g),pH值为6.88,TVB-N值为37.08 mg N/100 g,TBA值为1.81 mg MDA/kg。硬度、弹性和色差b*值与贮藏时间呈显著负相关。电子鼻LA分析结果与贮藏期鱼肉品质变化相吻合。

摘要:目的:了解刺伤导致青霉菌侵染苹果的特性和评估伤口抗病性。方法:苹果刺伤后不同时间在伤口远近部位接种青霉菌。用过氧化氢(H2O2)诱导细胞死亡,用伤液诱导抗病性。检测病斑大小、腐烂率、木质素、总多酚含量,提取伤液进行青霉菌抑制试验。结果:迟接种青霉菌比早接种腐烂率低。刺伤虽能诱导伤口局部和远处产生抗病性,但远处的抗病性不强。H2O2诱导组织死亡,即使没有青霉菌侵染,也会导致伤口水浸状。如果接种青霉菌,就会显著加快腐烂。刺伤后木质素含量持续上升,总多酚含量高于对照。伤液虽不能抑制青霉菌,但浸涂伤液可以显著提高抗病能力。结论:如果防止伤口周边细胞死亡,推迟青霉菌接触时间,将有利于防止青霉菌侵染。

摘要:采用响应面分析法优化超声辅助提取纳豆菌糖肽工艺。在单因素试验的基础上,研究液料比、NaCl浓度、超声时间对纳豆菌糖肽提取得率的影响。通过Box-Behnken试验设计和响应面分析法确定提取BNP的最佳工艺条件。试验结果表明,超声辅助提取纳豆菌糖肽的最佳工艺条件是:液料比24∶1 mL/g,NaCl浓度0.15mol/L,提取时间41 min。在此条件下,BNP最高提取得率为1.89%。

摘要:在单因素试验的基础上,利用响应面法优化菊米黄酮的提取工艺,并对菊米不同极性部分的抗氧化活性进行了研究。试验结果表明:回归方程较好地反映了菊米黄酮提取率与提取时间、提取温度和乙醇体积分数的关系。最优工艺条件为提取时间3.0 h、提取温度69℃、乙醇体积分数53%。在此工艺条件下,菊米黄酮提取率为9.45%。回归模型的预测值与实测值的相对误差为0.32%,该回归方程与实际情况拟合较好。抗氧化活性研究显示:菊米不同极性组分DPPH自由基清除率均高于VE,菊米正丁醇萃取相抗氧化活性较佳。

摘要:从pH值、碳源、氮源、常量元素、微量元素、生长因子、接种量、种龄、转速、发酵温度、发酵时间方面优化类球红细菌3757发酵生产辅酶Q10的工艺。结果表明,较优的培养基组成是:葡萄糖4.0 g/L,牛肉膏1.0 g/L,磷酸氢二钾0.9 g/L,磷酸二氢钾0.6 g/L,无水氯化钙0.075 g/L,EDTA 0.02 g/L,微量元素溶液10 mL,生长因子溶液10 mL,调节pH 7.0。微量元素溶液配方:硫酸锰1.6 g/L;生长因子溶液配方:维生素B11.0 g/L,烟酰胺(VPP)1.0 g/L,生物素0.016 g/L,对氨基苯甲酸1.0 g/L。较优的培养条件:种龄24 h,接种量10%,转速180 r/min,发酵温度32℃,发酵时间24 h。优化发酵工艺后类球红细菌辅酶Q10的产率较优化前提高了35.1%。

摘要:采用正交试验优化木糖葡萄球菌A2的增殖培养基配方,并确定其高密度培养条件和高密度培养物的富集条件。通过单因素试验确定木糖葡萄球菌A2液体培养基的最佳碳源为乳糖,最佳氮源为示蛋白胨,最佳营养因子为酵母膏和香菇汁;利用L9(34)正交试验得出增殖培养基的最佳配方为0.5%乳糖、2%示蛋白胨、0.2%酵母膏、5%香菇汁和7.5%NaCl。木糖葡萄球菌A2高密度培养的最适初始pH值为7.5,最适装液量为90%。以最佳培养基和培养条件在32℃培养17 h后,菌液中活菌数可达到3.43×109CFU/mL。对高密度培养物进行富集的最佳条件为6 000 r/min离心30 min,离心后菌种存活率为82.5%,浓缩倍数为74.48倍,活菌菌密度可达2.07×1011CFU/g。本研究成果可为生产发酵肉制品的直投式发酵剂提供优良菌种。

摘要:研究从几种天然产物中筛选出有效的黄嘌呤氧化酶抑制剂。采用酶促反应动力学的方法研究绞股蓝皂苷、葛根素、苹果多酚、褐藻糖胶4种天然产物的黄嘌呤氧化酶体外抑制作用,进行动态监测,绘制LineweaverBurk曲线,计算IC50值,探讨其抑制效果和作用方式。试验结果表明,苹果多酚可以通过反竞争性抑制作用,有效抑制黄嘌呤氧化酶活性;褐藻糖胶虽在体外模型中也表现出显著抑制黄嘌呤氧化酶活性的作用,但抑制类型不典型。上述两种活性物质是来源于普通食品中的天然产物,具有安全可靠的特性,可以作为改善高尿酸血症患者健康状况的保健类食品原料。

摘要:目的:研究几种抑制剂对水蜜桃多酚氧化酶酶促反应的抑制效应。方法:对水蜜桃多酚氧化酶底物特异性进行分析,在确定最适底物的基础上,采用酶动力学方法研究谷胱甘肽、L-半胱氨酸、氟化钠对水蜜桃多酚氧化酶活性的抑制效应。结果:谷胱甘肽、L-半胱氨酸、氟化钠均能抑制水蜜桃多酚氧化酶活性,3者导致酶活力下降50%的浓度(IC50)分别为0.22,0.06,4.57 mmol/L,其中前两者表现为竞争性抑制,后者为非竞争性抑制;3者对水蜜桃多酚氧化酶的抑制常数分别为0.2435,0.4974,0.43 mmol/L。在降低水蜜桃多酚氧化酶酶活的同时,谷胱甘肽和L-半胱氨酸对酶促反应有延滞作用。结论:谷胱甘肽、L-半胱氨酸、氟化钠均可有效抑制水蜜桃多酚氧化酶酶促反应速率,L-半胱氨酸的抑制效果最强,氟化钠抑制效果最差。本试验可为水蜜桃等果蔬深加工过程中抑制剂的应用提供一定参考。

摘要:目的:研究丝胶肽对乳酸菌的冷冻保护作用及其在乳酸菌发酵液冻干过程中对乳酸菌的保护作用。方法:用OD法检测丝胶肽对乳酸菌低温冷藏后菌活力的影响;将丝胶肽添加到乳酸菌发酵液中,真空冷冻干燥后用改进的菌落计数法检测酸奶粉中的菌含量。结果:丝胶肽能明显减轻低温冷藏对乳酸菌的损伤;将丝胶肽应用于制备发酵酸奶的真空冷冻干燥工艺中,当其添加量达1.2%时,具有明显的菌活性保护效果,活菌数约为空白组的3倍。结论:丝胶肽不仅对乳酸菌有冷冻保护作用,而且有助于提高乳酸菌抗脱水干燥胁迫作用。

摘要:以甜荞淀粉为原料,采用响应面法优化酸法制备抗性淀粉的工艺条件,在单因素试验的基础上,选取液料比、稀酸添加量、酸解时间、4℃冷藏时间为影响因素,以抗性淀粉得率为响应值,进行响应面分析。试验结果表明,酸法制备甜荞抗性淀粉的最佳工艺条件是:液料比7.69 mL/g,稀酸添加量3.08%,酸解时间2.35 h,4℃冷藏时间37.99 h。在此条件下,抗性淀粉得率可达到36.95%。对原淀粉和抗性淀粉的颗粒形貌进行观察,淀粉颗粒结构发生很大的变化,由规则光滑的球形变为不规则的晶体结构。

摘要:为探讨普冰9946小麦粉面包和馒头加工品质,以普冰9946小麦粉为原料,采用TPA技术,研究不同添加量的谷朊粉对普冰9946小麦粉面包和馒头质构的影响。试验结果表明,谷朊粉对面包和馒头制作影响较大,加入10%谷朊粉和2%谷朊粉,面包和馒头的硬度、弹性、胶黏性和咀嚼性变化差异显著,对面包和馒头品质改善效果最好。随着添加谷朊粉量的增加,弹性增加,面包和馒头的硬度、胶黏性和咀嚼性降低,内聚性和回复性变化不显著。添加谷朊粉可以改变面包和馒头的质构,提高面包和馒头的品质。

摘要:研究了添加菊粉对小麦面团流变学特性及面条质构的影响。试验结果表明,小麦粉中添加菊粉能够明显改善面粉粉质特性和拉伸特性。随着菊粉比例提高,添加菊粉的面团吸水率下降,面团形成时间和面团稳定时间延长,弱化度减小,粉质评价值升高,弹性和延展性也有所提高。添加菊粉能延长面粉的糊化时间,降低面粉的黏度,并且减少回生值和崩解值。仅当菊粉取代量小于7.5%时,面条的各项TPA指标均无显著变化。

摘要:利用快速黏度分析法、质构分析法、冻融循环等方法探讨自然条件下食盐、糖、酸或碱等环境中亚麻多糖对3种薯类改性淀粉糊化特性及冻融稳定性的影响。试验结果表明:自然条件下,亚麻多糖显著增强马铃薯醋酸酯淀粉、木薯醋酸酯淀粉、木薯羟丙基二磷酸酯淀粉的膨胀力,降低热稳定性,使木薯羟丙基二磷酸酯淀粉的凝胶结构更加紧密,提高木薯羟丙基二磷酸酯淀粉的冻融稳定性。在盐、糖环境中,亚麻多糖均能增强马铃薯醋酸酯淀粉、木薯醋酸酯淀粉、木薯羟丙基二磷酸酯淀粉的膨胀力,降低热稳定性,提高冻融稳定性。亚麻多糖可提高薯类改性淀粉在酸性或碱性条件下的膨胀力,改善薯类改性淀粉在酸性条件下的冻融稳定性。

摘要:甲壳类动物作为水产品中的1类,其市场和消费群体不断扩大。由甲壳类水产品引发的食物过敏日益增多。本文简要介绍了甲壳类水产品过敏蛋白的种类、结构及鉴定方法,并对其致敏反应机理及免疫调控分子机制进行了重点阐述。

摘要:本文优化了冷藏过程中鱼糜制品DNA提取的前处理方法,并采用5种方法提取,应用分光光度法和琼脂糖凝胶电泳估计DNA的纯度和得率;比较了普通PCR和降落PCR反应的扩增效果,运用DGGE分析了鱼丸在冷藏过程中细菌菌群的多样性,并在割胶回收后克隆、鉴定及测序。试验结果表明:玻璃珠-试剂盒法为最佳的DNA提取方法,梯度PCR扩增较普通PCR扩增产物多且纯度高;随着冷藏时间的延长,鱼丸中的细菌种类和数量呈一定的变化趋势,说明PCR-DGGE技术可用于分析鱼丸在冷藏过程中细菌菌群的变化规律。

摘要:利用同源克隆和基因组步移技术克隆得到酸土脂环酸芽孢杆菌(DSM 3922T)DnaK基因全序列,其ORF全长1 854 bp,编码617个氨基酸,推测其氨基酸序列与来源于A.acidocaldarius LAA1的分子伴侣蛋白DnaK同源性最高,相似性达86%。利用同源建模对DnaK的二级结构和超二级结构的预测结果显示,该伴侣蛋白主要由α-螺旋和β-折叠组成,基本不含无规则卷曲,具有耐热蛋白质的特征。

摘要:利用改良的CTAB法提取高质量的DNA,对菠菜AFLP反应体系中酶切与连接、预扩增、选择性扩增等关键试验条件进行优化,建立了适合菠菜AFLP分析的反应体系:酶切连接采用一步法,即模板DNA150 ng,EcoRⅠ/MseⅠ各0.25 U,37℃酶切5 h,16℃连接6 h;预扩增体系浓度dNTPs 0.2 mmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,预扩增产物稀释200倍作为选择性扩增体系模板。利用优化的反应体系,从256对E+ANN/M+ANN引物组合中,筛选出20对条带清晰、多态性丰富的引物组合,为菠菜群体的遗传多样性、种质鉴定等研究提供了理论基础。

摘要:为制备山羊乳酪蛋白抗菌肽,阐明抗菌肽的构效关系,采用LS-106大孔吸附树脂、凝胶色谱和高效液相色谱(HPLC)对山羊乳酪蛋白酶解物进行逐级分离纯化,以对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)为指标,对分离组分进行抑菌试验,采用预测软件、质谱与圆二色谱对分离抗菌肽的一、二级结构进行预测和鉴定。试验结果表明:(1)大孔吸附树脂分离酶解液,其中体积分数为60%的乙醇洗脱组分抑菌作用较强。(2)凝胶色谱将60%乙醇洗脱组分分离成3个色谱峰,峰3抑菌作用较强。(3)HPLC将峰3分离为2个组分F3-1和F3-2,其中F3-1对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的MIC均为297.9μg/mL,MBC为1191.6μg/mL;F3-2对大肠杆菌的MIC和MBC分别为309.2,1236.8μg/mL,对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的MIC均为154.6μg/mL,MBC为618.4μg/mL。(4)F3-1和F3-2的一级结构分别为Leu-Gly-Gly-Val-Gln-Glu-Pro-Asp-Pro-Asn-Thr-Asp-Val-Arg(1497.76)和Val-Val-Asn-Leu-Glu-GluLys-Leu-Pro-Gly(1242.66)。F3-1和F3-2均属阴离子抗菌肽,虽然其抑菌作用稍弱于阳离子抗菌肽,但是其二级结构为无毒性的无规则卷曲结构,与α-螺旋结构抗菌肽相比,在食品、药品和化妆品等安全应用方面潜力巨大。

摘要:为检测脱脂豆粕中嘌呤含量,利用高氯酸水解豆粕样品中的核酸,采用高效液相色谱法测定豆粕粉中嘌呤含量。测定结果表明:色谱柱为Ultimate AQ-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温25℃,进样量10μL,流速1.0mL/mim,紫外检测器波长254 nm;流动相为水、冰乙酸、四丁基氢氧化铵以997∶1.5∶1.5的比例混合,再与无水甲醇以99∶1混合。以此方法测定的腺嘌呤、鸟嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤的精密度RSD分别为0.31%,0.27%,0.50%,0.41%;回收率分别为89.00%,86.90%,88.10%,81.30%。通过此方法测定脱脂豆粕粉中的嘌呤含量为253.0 mg/100g。

摘要:以牡蛎全脏器为原料,采用pH调节法(pH-shifting)分离提取牡蛎分离蛋白并对其氨基酸组成及蛋白组成进行分析。试验结果表明,牡蛎分离蛋白提取最佳碱溶条件为pH 12～13,最佳酸沉条件为pH 4.5～5.1。在最佳提取条件下获得的牡蛎分离蛋白得率为66.7%,蛋白纯度达92.5%(干基计)。牡蛎分离蛋白各种必需氨基酸均高于FAO/WHO推荐值,约占总氨基酸的42.44%,风味氨基酸和支链氨基酸含量也较高。SDS-PAGE电泳图谱显示牡蛎分离蛋白在200,97,44 ku处均出现比较明显的蛋白条带。本研究结果将为进一步开发利用牡蛎蛋白资源提供理论依据。