2015(3):1-7.
摘要:高通量测序技术以一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定为标志,目前已广泛应用于各个领域,对整个生命科学的发展起到极大的推动作用。本文结合前期开展的一些工作,综述高通量测序技术在乳制品微生物基因组和生物多样性中的应用情况。
2015(3):8-14.
摘要:目的:以高脂高胆固醇膳食喂饲仓鼠为动物模型,研究迷迭香提取物对机体血脂调控相关机制的影响。方法:实验动物随机被分为4组,分别为高脂高胆固醇膳食组(HF-HC),0.1%,0.3%,0.9%迷迭香提取物试验干预组。试验6周后,测定血脂水平及肝脏中胆固醇含量,用荧光定量PCR(Real Time-PCR)检测肝脏中调控胆固醇代谢基因表达水平。结果:血脂测定结果显示,0.3%,0.9%迷迭香提取物组仓鼠TG含量降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.01);肝脏中胆固醇含量随迷迭香提取物添加量的增加而降低,具有统计学差异性(P<0.01);荧光定量PCR分析显示,与对照组相比,迷迭香提取物能极显著降低试验组肝脏中胆固醇合成限速酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-Co A-R)m RNA的表达水平(P<0.01),提高胆汁酸合成限速酶7α羟化酶(CYP7A1)m RNA表达水平(P<0.01),然而迷迭香提取物对肝脏中低密度脂蛋白受体(LDLR)、肝X受体(LXRα)、胆固醇蛋白调节元件结合蛋白2(SREBP-2)基因表达水平无显著影响(P>0.05)。结论 :迷迭香提取物降血脂的作用机制很可能是通过抑制肝脏中胆固醇的内源合成,增强胆固醇向胆汁酸转化,进而增加胆固醇排泄来实现。
2015(3):15-23.
摘要:以聚乙烯醇、海藻酸钠为载体,固定化柚苷酶;以戊二醛为交联剂,考察固定化工艺条件对酶活的影响,研究固定化酶的部分酶学性质。用高效液相色谱法分析柚苷酶的α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶活力,结果表明:最佳载体组合为11%聚乙烯醇与0.5%海藻酸钠;当缓冲液p H 4、戊二醛含量1%、交联时间0.5 h、吸附时间3 h、加酶量141 U/m L、硼酸4%、Ca Cl21%时,固定化酶活力达到最大值。柚苷酶固定化后,α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶活力的最适温度提高5℃,最佳活性p H值提高1.0,p H稳定性基本不变,温度稳定性下降5℃。α-L-鼠李糖苷酶、柚苷酶的米氏常数(Km)固定化后都增大;α-L-鼠李糖苷酶的最大反应初速度(Vmax)经固定化后减小,柚苷酶的Vmax增大。将固定化柚苷酶重复使用7次后,它的α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶残余活力分别保持71%与80%。
2015(3):24-31.
摘要:分别采用直接水提法(W)、纤维素酶酶解法(C)和高压均质耦合纤维素酶法(HC)提取椪柑渣可溶性膳食纤维(SDF)。结果表明:W-SDF、C-SDF和HC-SDF对胆酸钠的吸附量分别为313.1,560.0和761.2 mg/g;对胆固醇的吸附量,在胃环境(p H 2)中分别为4.80,10.95和9.11 mg/g,在肠道环境(p H 7)中分别为5.43,11.87和10.58 mg/g;对NO2-的清除率分别为23.03%,18.48%和31.12%;对胰脂肪酶活性的抑制率分别为11.96%,31.69%和35.80%;表观黏度分别为0.104,0.188和0.245 Pa·s,HC-SDF的表观黏度明显大于前两者,且随着剪切速率的增长而减小,具有假塑性。
周茹; 倪渠峰; 林伟伟; 郑姣飞; 潘伟春; 傅玉颖; 李昂; 励建荣
2015(3):32-39.
摘要:以秘鲁鱿鱼为研究对象,研究盐离子强度对肌原纤维蛋白溶解性的影响。利用SDS-PAGE电泳分析了溶液中的蛋白质组成,并用Quantity One软件分析不同盐离子强度的肌原纤维中的4种蛋白质分子(肌球蛋白重链、副肌球蛋白、肌动蛋白、原肌球蛋白)的相对含量变化。为进一步了解肌原纤维蛋白溶解度对盐离子浓度的依赖性,采用紫外吸收光谱及二阶导数光谱研究盐离子浓度对肌原纤维蛋白3级结构变化的影响,并通过圆二色谱研究盐离子浓度对肌原纤维蛋白2级结构的影响。结果表明:盐离子浓度的改变会引起肌原纤维蛋白溶液中各种蛋白质分子组成的变化。随着盐离子浓度的升高,副肌球蛋白和原肌球蛋白的相对含量增加。这种盐溶效应部分源于蛋白分子空间3维结构及2级结构的变化。
2015(3):40-49.
摘要:本文研究了高静压条件下含水量变化对籼米淀粉和糯米淀粉颗粒结构的影响。研究表明,含水量为80%及90%的样品在压力作用下结构崩塌最显著。随着水分含量的增加,籼米淀粉及糯米淀粉的粒度增大,比表面积增大,孔径减小,结晶度先减小后增大。当水分含量较低时,压力使淀粉颗粒发生压缩塑化,结晶结构增强。傅里叶红外光谱分析发现水分含量的变化不会导致淀粉分子结构改变。
2015(3):50-57.
摘要:O-羧甲基壳聚糖(OCC)是壳聚糖的一种重要衍生物,具有良好的水溶性和胶凝性。以Ca Cl2为交联剂制备OCC/海藻酸钠(SAL)水凝胶,研究Ca Cl2浓度、Ca Cl2溶液p H值、交联温度、OCC与SAL质量比和OCC取代度对水凝胶在p H 1.2、p H 6.8和p H 7.4溶液中溶胀性的影响,同时测定不同取代度的OCC与SAL形成的水凝胶的质构特性,以期获得可实现肠道靶向释放且具有良好机械强度的p H敏感性水凝胶载体。结果表明:当OCC和SAL以质量比1∶1混合,Ca Cl2浓度为0.09 mol/L,交联p H 7,反应温度55℃时制备的水凝胶,在p H 1.2溶液中溶胀率最小,在p H 7.4溶液中溶胀率最大,呈现出较强的p H敏感性。OCC取代度对水凝胶的溶胀性与质构特性均有影响。取代度为0.51的OCC与SAL形成的水凝胶不具有p H敏感性,而取代度为0.35和0.87的OCC/SAL水凝胶在p H 1.2溶液中溶胀率较低,在p H 7.4溶液中溶胀率较高,表现出很强的p H敏感性。不同取代度OCC与SAL形成的水凝胶均具有良好的弹性,且硬度随着取代度的增加而降低。
2015(3):58-64.
摘要:以脱脂乳为原料,研究发酵剂和乳糖酶的比例、发酵温度、后熟时间3个单因素对鲜奶酪乳糖水解率的影响。通过响应面试验得出乳糖水解率最高的方案。在此基础上,通过感官评定研究发酵时间、后熟温度、凝乳酶添加量、糖的添加量4个单因素对低乳糖脱脂鲜奶酪品质的影响;由正交试验得出低乳糖脱脂鲜奶酪的最佳加工工艺:发酵剂添加量2%,乳糖酶添加量2.9‰(体积分数),凝乳酶添加量0.016%,糖的添加量5%,发酵温度39℃,发酵时间6 h,后熟温度4℃,后熟时间28 min。鲜奶酪的乳糖水解率为90.95%,高于乳糖不耐受症对乳糖水解率为70%的要求。其脂肪含量低于2.5%,组织状态良好,乳清析出适量,酸甜适宜,为一种新型低乳糖低脂鲜奶酪,市场前景广阔。
2015(3):65-73.
摘要:咖啡酸是一种天然的酚类化合物,属于羟基肉桂酸类,它广泛存在于水果和蔬菜中,具有良好的生物活性。本文通过多种体系对咖啡酸的抗氧化活性进行综合评价,包括总抗氧化能力、DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性、铁离子还原能力和金属离子螯合能力等。结果表明:咖啡酸具有很强的总抗氧化能力,极显著高于BHT和VC(P<0.01);具有较强的DPPH自由基(IC500.023 mg/m L±0.004 mg/m L)和ABTS自由基(IC500.18 mg/m L±0.006 mg/m L)清除活性;具有较强的铁离子还原能力并极显著高于BHT(P<0.01)。咖啡酸几乎不具备金属离子螯合能力。
2015(3):74-81.
摘要:苹果醋是一种营养健康的新型饮料产品,其以苹果酒为原料,采用液态深层发酵法进行生产。苹果酒中的氨基酸、碳源、氮源等营养物质对醋酸发酵效率有较大影响。本文采用响应面的方法对影响苹果醋发酵的主要营养物质进行优化,开发出一种能够显著提高苹果醋发酵效率的营养盐,其组成为:复合氨基酸8.93%、酵母粉17.86%、蔗糖71.43%、复合维生素1.78%。发酵过程营养盐添加量为5.60 g/L,发酵起始阶段添加9.70 g/L的醋酸钠。摇瓶分批发酵条件下,添加营养盐发酵周期比对照减少了12 h,生产强度达到1.04 g/L/h,提高了20.91%。摇瓶模拟分割发酵条件下,分割发酵周期减少12 h,分割发酵生产强度达到1.85 g/L/h,与对照相比提高了77.89%。该营养盐能显著促进菌体生长,提高菌体活性,从而提高发酵效率,缩短发酵时间,具有重要的推广应用价值。
2015(3):82-88.
摘要:以COMSOL Multiphysics软件为基础,建立纯传导和固液混合两种模型来模拟金枪鱼罐头的热杀菌过程。通过无线温度传感器检测热杀菌过程中130 g金枪鱼与55 g,4%Na Cl卤水罐头中心温度的变化,结果发现:固液混合模型的预测结果与试验数据十分吻合,而纯传导模型明显低估了罐内温度传递。在此基础上,用固液混合模型模拟工业杀菌条件(10 min-60 min-10 min/116℃)下金枪鱼罐头内的温度分布、速度分布及致死率值,结果发现最慢加热区(SHZ)位于罐高的22.9%50%之间,最慢冷却区(SCZ)位于罐高的50%81%处。在升温和降温阶段,罐内液体流速可达4.41 mm/s。杀菌结束时罐内最大与最小致死率值相差4.93 min,而中心点致死率与最小致死率相差很小。本文建立的模型可为金枪鱼罐头的热杀菌优化提供参考。
2015(3):89-96.
摘要:为提高芦笋复合型膳食纤维(DFC)的生理效用,以芦笋膳食纤维(DF)得率及芦笋DFC胆固醇和亚硝酸根离子吸附率综合评分为指标,对酶碱法芦笋DFC制备工艺进行优化,分别考察影响显著的因素——酶添加量、酶解时间、酶解温度、酶解p H值、碱解时间、碱解温度对综合评分的影响。在此基础上通过均匀设计法优化制备条件,得到回归模型。试验结果表明,回归模型能较好地预测综合评分与上述6个因素的关系,其最优工艺条件是:α-淀粉酶添加量1.5%、酶解时间81 min、酶解温度41℃、酶解p H 4.5、碱解时间185 min、碱解温度69℃。在此条件下芦笋DF得率74.69%,DFC胆固醇吸附率24.25 mg/g,亚硝酸根离子吸附率5.35 mg/g,综合评分96.22。
2015(3):97-105.
摘要:采用有机溶剂法研究香榧假种皮提取物的提取工艺。确定提取溶剂后,在单因素试验基础上,选取对提取率影响较显著的提取时间、提取温度、液料比3个因素作为变量,以香榧假种皮提取物得率为指标,采用Box-Behnken试验设计方法做三因素三水平试验,得到香榧假种皮提取物的提取工艺。利用Design Expert软件得到回归方程的预测模型,做响应面分析,确定香榧假种皮提取物的提取工艺:石油醚(沸程30~60℃)为溶剂,粉碎度40目,提取时间2.6 h,液料比11 m L/g,提取温度51℃。在此条件下提取物平均得率为18.28%。经GCMS分析,香榧假种皮提取物的主要成分为二萜类物质,其次为倍半萜类和单萜类物质。
2015(3):106-113.
摘要:通过Box-Benhnken响应面方法优化栀子黄色素与β环糊精包合物的制备工艺,确定最佳包合条件为:饱和β-环糊精溶液10 m L,栀子黄色素335 mg,温度50.0℃,搅拌时间1.0 h。在此条件下包合率为68.44%。采用红外光谱及扫描电镜对栀子黄色素和β-环糊精及其包合物的结构进行分析,结果表明:包合物的结构与主客体的结构明显不同,包合后形成新的固体相。在黑暗、室外曝光、室内光照及不同的p H值条件下,比较栀子黄色素-β-环糊精包合物及未被包合栀子黄色素的稳定性,结果包合物的光稳定性高于未被包合的栀子黄色素的稳定性。两者具有相近的酸碱稳定性,并且碱性条件下的稳定性远高于酸性条件下的稳定性。
2015(3):114-119.
摘要:以β-环糊精为壁材,采用饱和水溶液法对香芹酚进行包合,通过正交试验优选出制备包合物的最佳工艺参数为:芯壁比1∶8,包合时间2 h,包合温度60℃。在此条件下,包合率达61.89%。采用扫描电镜和荧光光谱对包合物进行表征,验证了包合物的形成。包合物释放与抑菌试验结果表明:环境温度与湿度都影响包合物中香芹酚的释放,且缓慢释放出的香芹酚具有一定的抑菌作用,当用量达0.05 g时,香芹酚包合物对桔青霉的抑制效果达到极敏。
2015(3):120-127.
摘要:为提高苹果多酚的保存率和应用效果,以纯度为95%的富士苹果果皮和果肉粗多酚为试材,研究常见添加剂对果皮和果肉多酚溶液中总酚、原花青素和总黄酮含量及DPPH·清除率的影响。结果表明:1)随着苯甲酸钠浓度的增加,苹果果皮或果肉多酚溶液中总酚和总黄酮含量显著增加,原花青素含量没有显著变化,果皮多酚溶液对DPPH·的清除率显著降低,而果肉多酚溶液对DPPH·的清除率先增加后降低;随着山梨酸钾浓度的增加,果皮多酚溶液中总酚含量及其对DPPH·的清除率均显著降低,总黄酮含量先增加后降低,原花青素含量没有显著变化,果肉多酚溶液比较稳定;2)随着VC溶液浓度的增加,总酚、原花青素含量及其对DPPH·的清除率显著增加,总黄酮含量显著降低;随着Na2SO3溶液浓度的增加,总酚含量显著增加,总黄酮含量和对DPPH·的清除率显著降低,原花青素含量没有显著变化;3)随着H2O2溶液浓度的增加,果肉多酚溶液中总酚含量及其对DPPH·的清除率显著增加,原花青素和总黄酮含量显著降低。当来源不同的苹果多酚溶液在保存或应用时,应该根据需要考虑添加剂的种类和浓度。
2015(3):128-136.
摘要:以"凤冠"草莓为材料,研究了0,1.5,3.0和4.5 k J/m2UV-C处理对草莓果实在10℃,12 d贮藏期间果实品质、呼吸强度、内源乙烯产生、可溶性糖、己糖激酶活性(HXK)、果糖激酶活性(FRK)和抗氧化酶活性的影响。结果表明,3.0 k J/m2UV-C处理能抑制草莓果实的呼吸速率和乙烯释放量,减少可滴定酸和维生素C的损失,维持果实较好的食用品质。同时发现,3.0 k J/m2UV-C处理果实中FRK和HXK活性显著高于其余3个处理果实,维持了整个贮藏期间较高的FRK和HXK活性,促进了贮藏后期果实中果糖和葡萄糖含量的下降。此外,3.0 k J/m2UV-C处理能维持草莓果实中较高的SOD,CAT,APX和POD的活性,降低超氧阴离子和MDA的积累。这表明,适宜剂量的UV-C处理(3.0 k J/m2)能维持草莓果实采后活性氧代谢通畅,抑制膜脂过氧化反应发生,延缓果实衰老的发生;3.0 k J/m2UV-C处理可能启动采后草莓果实己糖信号传导,调控草莓果实采后花色苷的合成和积累,进而促进了果实采后转色。
2015(3):137-145.
摘要:为了探究高效、无公害的核桃保鲜方法,以"辽宁2号"青皮核桃为试材,分别采用80 mg/L二氧化氯(Cl O2)和0.5μL/L 1-甲基环丙烯(1-MCP)处理,将青皮核桃(湿鲜坚果)二步贮藏于0~1℃,相对湿度70%80%条件下,并以清水浸泡为对照。贮藏期间观测果实的保鲜效果、核仁抗氧化特征及品质的变化。结果表明:Cl O2处理延迟青皮果实腐烂6 d,延迟脱青皮坚果霉变5 d。第1步贮藏结束时(60 d)Cl O2、1-MCP和对照果实的腐烂指数分别为14.2%,20.1%,18.7%;第2步贮藏40 d,二步贮藏结束时(60+40)d,三者坚果的霉变率分别为11.6%,30.3%,24.8%。种皮、核仁的总酚和类黄酮含量分别于(60+20)d,(60+30)d前上升,之后下降,Cl O2处理的峰值均显著高于其他处理(P<0.05)。三者的核仁抗氧化活性与其总酚变化一致。Cl O2处理的核仁感官品质下降以及酸价、过氧化值、可溶性蛋白含量、丙二醛(MDA)含量和脂氧合酶(LOX)活性增加均显著慢于对照,而1-MCP处理的上述变化居中。Cl O2处理明显延缓了青皮核桃腐烂和湿鲜坚果霉变,保持了较高的核仁品质。1-MCP仅延缓了核仁品质下降。
2015(3):146-150.
摘要:研究稻谷加工工艺(砻谷、碾米)与稻谷镉去除率的关系,明确通过砻谷、碾米工艺获得大米镉含量达标的可能性,为制定镉超标稻谷的加工利用技术提供科学依据。以不同镉含量的稻谷为材料,通过砻谷、碾米获得不同加工精度的大米;使用微波消解-石墨炉原子吸收光谱法检测其镉含量,分析稻谷在砻谷、碾米过程中镉含量的动态变化。结果表明:1)稻谷经砻谷加工后镉含量降低;镉含量低于0.226 mg/kg的稻谷,通过砻谷获得镉含量达标(0.2 mg/kg)的糙米。2)碾米加工可降低大米的镉含量,当碾米精度为23.83%时对镉的去除效果最佳;镉含量低于0.288 mg/kg的糙米,通过碾米获得镉含量达标的大米。3)镉含量高于0.323 mg/kg的稻谷,应考虑其他加工途径去除或降低大米或产品的镉含量。
陈思; 吴昊; 路西; 钟凯; 谢晓非; 李希琳; 罗晓静; 郭丽霞
2015(3):151-157.
摘要:目的:了解我国公众对食品添加剂的认知现状及影响因素,为食品添加剂风险交流提供策略支持。方法:采用随机抽样方法,对全国7省份城市和农村14个调查点进行自填式问卷调查。结果:我国公众对于食品添加剂有较高的风险认知,72.5%的受访者存在概念误区,将三聚氰胺等违法添加物视为食品添加剂。公众对食品添加剂风险的高感知,起到主导作用的是政府、企业在食品安全相关工作上的履职信任而非概念知识的缺乏。结论:要促进食品添加剂的科学认知,应以政府和企业信任培育为交流工作的核心策略目标,而在信任培育上,提升政府和企业的关心信任比能力信任更有效。
2015(3):158-165.
摘要:目的:研究分离于广东、广西、福建和上海4省(市)零售鸡肉源沙门氏菌对萘啶酮酸和部分氟喹诺酮类抗生素的药敏性及相关耐药基因,以更好地了解耐药性的产生和传播途径,确保食品安全。方法:使用临床和实验室标准协会推荐的琼脂稀释法测定沙门氏菌的药敏性,用PCR、基因序列测定和基因库在线比对方法确定耐药沙门氏菌中与(氟)喹诺酮类抗生素耐药相关的gyr A亚基中喹诺酮类抗性决定区,par C亚基中的氨基酸突变状况以及qnr质粒携带的与喹诺酮类抗生素耐药相关基因。结果:358株沙门氏菌中,59.78%的菌株对萘啶酮酸产生抗性,对环丙沙星、左氧氟沙星和加替沙星耐药的菌株比例分别为22.91%,17.88%和16.20%。214株萘啶酮酸抗性菌中,qnr A,qnr B,qnr S和aac(6′)-Ib-cr基因的检出率分别为11.68%,18.22%,3.27%和24.77%。82株环丙沙星抗性菌中,从gyr A和par C基因中共检出135个氨基酸突变点,其中从gyr A基因中检出65个突变点,从par C基因中检出70个突变点。gyr A基因中以Asp87Asn突变最为常见(47.69%;31/82),其次分别为Asp87Gly(38.46%,25/82),Asp87Tyr(4.62%,3/82),Ser83Phe和Asp87Asn双突变(3.80%,1/82),Asp87Asn和Ile89Val双突变(3.80%,1/82),Asp87Asn和Val90Gly双突变(3.80%,1/82)。par C基因中Ser80Arg突变最为常见(90.00%,63/82),其次分别为Met118Ile-Arg119Leu-Thr121Ser三突变(4.29%,1/82),Ser80Arg和Tyr120Phe双突变(2.86%,1/82),Ser80Ile(1.43%,1/82)和Ala81Val(1.43%;1/82)。结论:4省市中鸡肉源沙门氏菌对萘啶酮酸和部分氟喹诺酮类抗生素耐药严重,其中解旋酶和拓扑异构酶基因突变以及沙门氏菌携带的qnr A,qnr B,qnr S和aac(6′)-Ib-cr基因是沙门氏菌耐药的重要原因。
2015(3):166-174.
摘要:以微晶纤维素为原料,采用新型水热氧化合成方法,制备固载酶基质材料-双醛纤维素。通过固定化酶化学键联技术制备固定化乙酰胆碱酯酶。利用扫描电镜和红外光谱对产物进行结构表征,固载酶修饰玻碳电极制备ACh E生物传感器。以O,O-二甲基-O-(2,2-二氯乙烯基)磷酸酯为反应物,碘化乙酰硫代胆碱为底物,采用循环伏安和差分脉冲伏安法考察新型传感器对农残的检测性能。结果表明:成功制备了新型固载酶电化学生物传感器,其对DDVP检测的线性范围为0.01~50μg/m L,检出限为6.99 ng/m L,具有很好的重现性和稳定性。本结果可为食品有机磷农药残留的检测提供一种新的分析方法。
2015(3):175-180.
摘要:为建立分子印迹固相萃取-高效液相色谱法检测食品中3种三唑类杀菌剂残留的方法,分别以联苯三唑醇、烯唑醇和腈菌唑为模板分子,α-甲基丙烯酸(MAA)和丙烯酰胺(AM)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,采用本体聚合法合成分子印迹聚合物。将制得的联苯三唑醇、烯唑醇和腈菌唑聚合物按质量比1∶1∶1混合,制成固相萃取柱,用于样品的前处理,采用高效液相色谱法检测。结果表明,联苯三唑醇、烯唑醇和腈菌唑在5 min内实现基线分离。在低和高浓度添加水平下,平均回收率在90.6%92.7%之间,RSD在1.2%3.3%之间(n=5),联苯三唑醇的检测限为0.1μg/g,烯唑醇和腈菌唑的检测限为0.2μg/g。该方法分析速度快,灵敏度高,精密度好,适合于同时检测食品中联苯三唑醇、腈菌唑和烯唑醇3种三唑类杀菌剂残留。
2015(3):181-186.
摘要:辐照处理刀额新对虾中主要过敏原Pen a1,采用SDS-PAGE,MOLDI-TOF MS方法分析辐照处理对虾致敏蛋白Pen a1分子质量的影响,同时利用表位抗体进行免疫印迹及间接竞争ELISA法评估Pen a1中5种抗原表位免疫原性的变化情况。结果显示:与未处理相比,6.7 k Gy辐照处理能够破坏部分Pen a1蛋白结构,导致裂解和聚合现象的发生。5种抗原表位免疫原性均未降低,并有不同程度的增加,其中Epitope1,2,3,4的IC50值约为对照的4/5,Epitope5的IC50值变化不大,说明其对辐照处理较稳定。低剂量的辐照处理不能降低Pen a1抗原表位的免疫原性。
2015(3):187-193.
摘要:重组酶聚合酶扩增技术(RPA)是利用重组酶和单链结合蛋白在常温下协同实现引物与模板的特异结合,以代替传统PCR热循环中的变性和复性过程的新型恒温体外核酸扩增技术。本研究基于RPA技术建立了转基因水稻Cry1Ab/c基因的检测方法,可在37℃恒温条件下快速检测到转基因水稻中的Cry1Ab/c基因,具有较好的特异性,其绝对及相对检测灵敏度分别达到100个拷贝和0.1%(质量分数),适用于基层实验室及现场快速检测转Cry1Ab/c基因水稻及其制品。
2015(3):194-200.
摘要:本文研究了首次在中国白酒中发现的乳酸丙酯。在对茅台、五粮液、汾酒、古井、扳倒井、今世缘、泰山、景芝、红星、兰陵、趵突泉、衡水老白干、四特、湘山、石湾、玉林泉、玉泉、西凤、北京顺鑫19个著名白酒生产厂商的30种白酒的分析中发现,乳酸丙酯含量在0.151~3.346 mg/L范围。对乳酸丙酯的香气特征进行评价,其香气特征为酯香、似葡萄的清甜果香和奶香。采用直接进样法结合标准品定性,建立了气相色谱-质谱/选择离子扫描法分析白酒中乳酸丙酯的方法。色谱条件是:DB-FFAP毛细管柱,程序升温;内标法定量,选择乳酸甲酯作内标;乳酸丙酯,选择质荷比为m/z 45,75和117的离子进行SIM扫描;乳酸甲酯,选择质荷比为m/z 45,75,89和105的离子进行SIM扫描。结果表明:在乳酸丙酯质量浓度0.005~5.000 mg/L范围,线性回归方程y=2.6032x-0.1984,线性相关系数0.9958;检测限0.025 mg/L;定量限0.050 mg/L。
2015(3):201-206.
摘要:目的:对戊糖乳杆菌31-1的群体感应信号肽进行提取、纯化和鉴定。方法:经硫酸铵盐析、超滤、疏水层析、凝胶层析和RP-HPLC步骤纯化戊糖乳杆菌31-1的群体感应信号肽。用MALDI-TOF质谱测定纯化后的小肽AIP的分子质量,并用EDMAN降解法对其N端氨基酸测序。用组氨酸蛋白激酶抑制剂——氯氰碘柳胺验证其群体感应信号肽分子功能。结果:纯化的信号肽AIP的比活力达160 000 IU/m L,纯度提高了800倍。该小肽的分子质量为2 985.16 u。其N端前15个氨基酸序列为NH2-KSSAYSLQMGATAIK。氯氰碘柳胺所造成的戊糖乳杆菌31-1细菌素合成功能的缺失,不能通过添加小肽AIP而得以恢复,证实了小肽AIP的群体感应信号肽分子功能。结论:群体感应信号肽AIP的获得为戊糖乳杆菌31-1细菌素的发酵调控奠定了基础。
2015(3):207-215.
摘要:以银杏种仁为材料,采用乙醇浸提、石油醚萃取的方法提取酚酸,研究银杏种仁酚酸硅胶柱层析纯化工艺。采用液相色谱(HPLC)及液-质联用(LC-MS)分析银杏种仁中酚酸的组成及含量。以2种细菌及4种真菌为供试菌,比较银杏种仁酚酸的抑菌活性,并确定其对各菌种的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,以流速为1.2 m L/min的石油醚-乙醚-甲醇(89∶11∶1,V/V/V)为洗脱液,对银杏酚酸粗提物进行硅胶柱层析纯化,取得较好的纯化效果。HPLC及LC-MS分析表明:银杏酚酸主要由C13∶0,C15∶1,C17∶2,C15∶0和C17∶1等5种酚酸组分组成。以C13∶0,C15∶1,C17∶1计,银杏种仁中的酚酸含量为0.11 g/kg脱脂干粉,其中C13∶0,C15∶1,C17∶1的含量分别为0.013 g/kg脱脂干粉、0.042 g/kg脱脂干粉、0.055 g/kg脱脂干粉。抑菌试验表明,银杏酚酸对供试的2种细菌(大肠杆菌和枯草芽孢杆菌)以及4种真菌(青霉、产紫青霉、沙门柏干酪青霉、黑曲霉)有抑制作用。银杏酚酸对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌及青霉菌有较好的抑菌效果,其MIC分别为7.5,15和25 mg/m L。
2015(3):216-222.
摘要:目的:为弄清中医理论上韭菜具有活血和止血的原因,以及了解食用韭菜是否可能对凝血不稳定或正服用抗凝血药剂的人群产生影响,对韭菜进行体外抗凝血试验。方法:干韭菜用70%乙醇60℃浸提,所得浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水进行分相萃取。水相用乙醇沉淀分离。将乙醇沉淀的上清液过活性炭柱,收集不同浓度的乙醇洗脱液。95%乙醇洗脱液用Sephadex LH-20分离,收集洗脱液。对各种分离物质进行体外抗凝血试验。对Sephadex LH-20分离的具有较强抗凝血活性6个组分用多种显色技术进行物质类别鉴定。结果:体外抗凝血研究中,正丁醇的抗凝血作用极强。韭菜中正丁醇萃取相能明显降低该作用,说明正丁醇萃取相中含有促进血浆凝集物质;水萃取相能够显著延迟凝血时间。韭菜乙醇沉淀上清液和沉淀均能抑制凝血,乙醇沉淀上清液抗凝血效果强。韭菜乙醇沉淀上清液过活性炭柱后,其95%乙醇洗脱液抗凝血活性最强。该洗脱液过Sephadex LH-20柱后得到的8个分离相,有6个具有较强的抗凝血活性,其中S2抗凝血活性最强。该6种物质属于有机物,即4种酸性,不含有糖基;2种p H中性,含有糖基,在365 nm处显示为蓝色荧光,没有明显的香豆素的开环闭环反应,均带有氨基。结论:韭菜水溶性物质具有强烈的抗凝血作用,而其正丁醇提取物具有促进凝血作用。水相中的主要抗凝血成分是一大类物质,可能为氨基-苯丙酸类及其苷类物质。
2015(3):223-228.
摘要:分别采用微波提取和热水提取裂褶多糖,研究微波提取多糖(MES)和热水提取多糖(HWES)在化妆品中的应用性能。采用单一保湿剂体外试验和人体保湿试验两种方法,与对照品(甘油和燕麦β-葡聚糖)进行保湿功效比较研究。体外保湿试验结果表明:在湿温相对度(RH)62%条件下,24 h内保湿性大小顺序为甘油>MES>HWES>燕麦β-葡聚糖>空白;在RH 85%条件下,4 h内保湿性大小顺序为甘油>HWES>MES>燕麦β-葡聚糖>空白,4 h后,MES的保湿率大于HWES。人体保湿试验结果表明:裂褶多糖的保湿效果优于燕麦β-葡聚糖,MES的综合保湿效果较HWES更好,尤其是使用1 h内的即时锁水保湿性更强。
2015(3):229-236.
摘要:以紫贻贝酶解液为原料,采用氨基酸分析、GC-MS分析法、电子鼻技术并结合感官评价等方法研究Maillard反应对紫贻贝酶解液风味变化的影响。氨基酸分析表明:酶解液中的游离氨基酸除丙氨酸、脯氨酸、胱氨酸和蛋氨酸外,其余的大部分氨基酸参与了Maillard反应。GC-MS结果表明:未发生Maillard反应的样品EHS中挥发性成分主要为羧酸类和醛类,部分Maillard反应的样品NARS和充分Maillard反应的样品ARS中的挥发性化合物主要为羧酸类、酯类、酮类、醛类、吡嗪类、醇类、含硫类等化合物,说明Maillard反应是产生海鲜风味物质的主要途径。后两者的挥发性化合物组成差异显著,样品ARS含有的能产生海鲜味的挥发性成分种类明显比样品NARS的多,其含量也比样品NARS的丰富。电子鼻响应值分析表明:与样品EHS和样品NARS不同,样品ARS中产生了较多的芳香成分、氮氧化合物、烷类化合物、醇类化合物等。Maillard反应过程有利于海鲜风味成分的形成。
2015(3):237-242.
摘要:采用毛细管柱气相色谱法分离检测大豆油不饱和脂肪酸高温加热异构化形成的反式脂肪酸(TFA)种类及含量,并比较分析TFA与酸价、羰基价和极性组分等油脂理化指标随加热时间的变化情况。大豆油经220℃高温加热后形成了大量的TFA,加热12 h时TFA含量由对照组的0.075 g/100 g增加至5.691 g/100 g,其种类主要为反式亚油酸和反式亚麻酸。酸价、羰基价和极性组分等理化指标在220℃下随着加热时间的延长而极显著增加(P<0.01),且需要较长的加热时间(48 h以上)才能超过限量值。TFA的含量在加热时间12 h内积累到推荐限量(2 g/100g)的2倍以上。本研究结果为建立高温烹调来源的食用油中TFA限量指标及其控制措施提供科学依据。
2015(3):243-247.
摘要:以杏鲍菇子实体为材料,在40℃和70℃下干制,检测不同干制温度下杏鲍菇主要酶活性以及细胞结构的变化。结果表明,在两个干制温度处理,杏鲍菇的纤维素酶活性和中性蛋白酶活性均增强。在40℃处理下,漆酶活性大幅度的提高,而在70℃处理下漆酶活性大幅度降低。不同温度处理对杏鲍菇整体的细胞结构无明显影响,然而细胞内营养物质组成有较大变化,并且促进了杏鲍菇细胞壁的纤维化程度。
2015(3):248-254.
摘要:以油菜、莲花、向日葵、杏花和茶花5种常见的蜂花粉为原料,通过索氏提取法获得5种花粉的粗脂肪,分别采用酸催化法、碱催化法和BF3催化法对花粉的粗提物进行甲酯化处理,并用GC-MS选择离子的检测方法进行分离鉴定。通过对比混合标准品的保留时间及每种花粉中脂肪酸的种类,使用外标法进行定量。结果表明:BF3催化法的甲酯化效果优于碱催化法和酸催化法。使用外标法对花粉中脂肪酸进行定量比归一化法准确。