单核细胞增生李斯特菌菌膜形成突变株的筛选
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“十一五”国家科技支撑计划课题(2006BAK02A14);?上海市科委2007重大科技攻关项目(07dz19508)资助


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    摘要:

    通过对功能和调控基因的研究,探讨单核细胞增生李斯特菌菌膜的形成机制,建立防治该细菌污染食品的方法.使用电转化的方法,将携带转座子Tn917的质粒pTV1-OK转化到单核细胞增生李斯特菌中,诱导转座,获得1 880个突变株,加上前期构建的突变株,使突变库增加到2 200株.使用96孔细胞培养板对随机挑选的1 000余株突变株进行菌膜培养,结晶紫染色后测OD595值.以此值作为菌膜形成量的筛选依据,最终挑选出菌膜形成能力变小的突变株8株.目标突变获得率约8‰.对筛选的菌膜形成量变小的突变株进行荧光显微现察,证实该8株突变株菌膜形成能力弱于野生菌株.通过PCR验证,这8株突变株的基因组中插入了Tn917,这可能是它们的表型发生变化的原因.

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引用本文

马瑜丹; 朱欣娜; 龙飞; 史贤明.单核细胞增生李斯特菌菌膜形成突变株的筛选[J].中国食品学报,2009,(2):11-17

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