文章摘要
蔡海莺;沈灵智;赵敏洁;李杨;毛建卫;冯凤琴.米黑根毛霉脂肪酶基因的酵母重组表达和Kex2位点改造[J].中国食品学报,2019,19(4):85-91
米黑根毛霉脂肪酶基因的酵母重组表达和Kex2位点改造
  
DOI:
中文关键词: 米黑根毛霉脂肪酶  重组表达  毕赤酵母  密码子优化  sn-1,3位置专一性
英文关键词: 
基金项目:浙江省自然科学基金一般项目(LY18C200006); 浙江省教育厅科研一般项目(Y201737161); 浙江省重大科技专项(2012C12005-2)
作者单位
蔡海莺;沈灵智;赵敏洁;李杨;毛建卫;冯凤琴 浙江科技学院生物与化学工程学院浙江省农业生物资源生化制造协同创新中心浙江大学生物系统工程与食品科学学院 
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中文摘要:
      米黑根毛霉脂肪酶(RML)具有较高的合成活性、热稳定性、溶剂耐受性以及sn-1,3位置专一性等一系列适合工业化推广的特点。本研究通过密码子优化改造RML编码基因,并将其克隆、转化到毕赤酵母GS115菌株,经诱导发酵156 h,酶活达到3.77 U/mL。为了进一步改善RML脂肪酶的重组表达,通过定点突变的方式去掉潜在的Kex2酶切位点,结果显示:RML突变体表达量均显著低于野生型的RML脂肪酶,表明"-Arg196-Arg197-"序列并不影响RML的重组表达。通过对RML蛋白结构分析,Kex2酶切位点的肽键被包埋在蛋白内部,这表明该位点区域的折叠在进入分泌途径时已基本完成。本研究对异源蛋白的酵母重组表达具有一定参考价值。
英文摘要:
      
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