纤溶活性重组纳豆激酶在大肠杆菌中的表达

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纤溶活性重组纳豆激酶在大肠杆菌中的表达
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基金项目:江西省教育厅项目:赣教高字[2006]114号,编号JXJG-06-3-22；?江西省科技厅项目:赣科发计字[2004]101号,编号:20031B0204900

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通过PCR方法扩增纳豆激酶成熟肽和纳豆激酶酶原(proNK)基因片段,并分别克隆到表达载体pET28a上,构建与His标签融合表达的重组表达质粒pET28a-NK和pET28a-proNK,转化大肠杆菌宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和纤维蛋白平板检测目的蛋白的表达及表达产物的纤溶活性.结果表明,纳豆激酶成熟肽基因在大肠杆菌中的表达产物以包涵体形式存在,表达产物没有纤溶活性;纳豆激酶酶原基因在大肠杆菌中的表达产物能自我剪切,形成有纤溶活性的纳豆激酶,但同时对宿主细胞有降解毒性.

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王萍；王文兵；陈钧；曾黎平.纤溶活性重组纳豆激酶在大肠杆菌中的表达[J].中国食品学报,2007,7(5):52-56

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