目前对猪肉品质评价的蛋白质组学研究较少,本研究目的在于建立分辨率高、重复性好的猪骨骼肌样品双向电泳技术。应用双向电泳(2-DE)技术,优化样品裂解液组成、肌肉组织研磨方式、水化方式及等电聚焦参数等影响猪骨骼肌2-DE分离效果的因素。研究结果表明,提高猪骨骼肌总蛋白双向电泳的分辨率和重复性的方法:①液氮研磨;②8mol/L尿素、2mol/L硫脲、4%CHAPS的裂解液成分;③主动水化和被动水化相结合的水化方式;④等电聚焦采用渐进式升压方式。通过优化后的2-DE体系,建立基于双向电泳的猪骨骼肌蛋白样品制备及等电聚焦方法,为猪肉品质评价的蛋白质组学研究提供基础数据。