摘要:以东海海参为原料,采用酶法提取胶原蛋白。选取木瓜蛋白酶、风味蛋白酶以及复合酶(木瓜-风味),在其最佳水解条件下水解,以自由基清除率为指标,确定最佳水解时间及酶种类。研究结果表明,用木瓜蛋白酶水解4 h得到的多肽清除自由基的能力最强,清除率在70%以上;多肽清除羟自由基和超氧自由基的IC50分别为27.8mg/mL和49.3mg/mL。通过超滤处理及DEAE琼脂糖离子交换柱(DEAE Sepharose FF)分离纯化抗氧化肽,得到分子质量小于5kDa的肽,其功能性最强。利用HPLC测定该肽的氨基酸含量,结果显示该肽段以甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro)、天冬氨酸(Asp)、精氨酸(Arg)、丝氨酸(Ser)和苏氨酸(Thr)为主。