目的:检测并分离猪肉生产过程中的大肠杆菌O157:H7(E.coli O157:H7),探讨其生物学特性。方法:采用大肠杆菌O157:H7荧光定量PCR方法对来自浙江某屠宰场的240个样本进行检测。对阳性分离株进行细菌培养特性及形态结构观察,16S rDNA基因序列系统发育分析,生化及血清型鉴定;对分离株纯培养物接种小鼠,用ATB细菌自动鉴定仪(ATB-G5)药敏试条做耐药性检测,用SLT1、SLT2和eaeA3种毒力基因做PCR检测。结果:共分离到02、03、04号3株阳性菌株,检出率为1.25%;确定3个分离株均为大肠杆菌O157:H7;分离株对抗生素出现不同程度的耐药性,其中02号分离株的耐药性高于03号、04号分离株;03号、04号分离株纯培养物接种的小白鼠在48 h内全部死亡,02号分离株接种的小鼠在72 h时出现食欲减退现象;03号、04号分离株含有SLT1、SLT2和eaeA3种毒力基因,而02号分离株仅含有eaeA毒力基因。结论:屠宰场被大肠杆菌O157:H7污染,且菌株出现较强的耐药性,应加强控制措施,以确保猪肉产品安全。