“十二五”国家科技支撑计划课题(2011BAD09B0304); 国家自然科学基金项目(31301519); 黑龙江科技厅面上项目(C201134)
以大肠杆菌TG1的染色体总DNA为模板,通过引物设计和PCR扩增,克隆获得编码Neu5Ac醛缩酶基因(nanA)的片段;以p ET28(b)构建的nanA基因重组质粒p ET28(b)-nanA转化大肠杆菌BL21(DE3),达到高产N-乙酰神经氨酸醛缩酶的目的。在得到的转化子大肠杆菌BL21(DE3)/pNA1中,nanA基因受lac启动子控制,为IPTG或乳糖所诱导表达。此工程菌产酶量在浓缩后达到6.13mg/m L。
李春; 戚晓熙; 杨鹤; 龚雅丽; 祁昕; 梁婉婷; 刘丽波. N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因在大肠杆菌中的高效表达[J].中国食品学报,2015,(8):71-77