研究葡萄汁有孢汉逊酵母β-葡萄糖苷酶的提取纯化步骤，为其增香酿造特性的研究提供技术支持。首先将优选酵母细胞在振幅为80的超声波下破碎20 min，进行β-葡萄糖苷酶的酶活定位，然后对优选菌株的培养条件和糖苷酶的分离纯化条件进行优化。结果表明，供试酵母菌株的β-葡萄糖苷酶为胞外酶，其最佳培养及提取纯化工艺：酵母在28 ℃发酵培养基中振荡培养72 h，4 ℃ 10 000 r/min离心10 min，收集上清液，然后经80%硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose-FF阴离子交换层析与Sephacryl S-200凝胶过滤层析3步纯化，得到β-葡萄糖苷酶液。纯化后β-葡萄糖苷酶回收率为6.91%，比酶活由0.081 U/mg提高至1.998 U/mg，为纯化前的24.56倍，纯化效果明显。