目的：类胡萝卜素双加氧裂解酶（CCD）是类胡萝卜素生物合成途径中的一个关键酶。旨在鉴定并克隆蛹虫草中的CCD酶，通过相关生物信息学分析和荧光定量PCR探究其结构、功能聚类以及表达调控。方法：用GenBank登录的CCD酶基因序列与蛹虫草基因组比对，在保守区域设计1对引物，以蛹虫草基因组的DNA为模板对CCD酶基因进行扩增，扩增产物命名为car-TC。car-TC基因连接载体后由生物公司测序；序列通过多种生物信息学软件和在线工具分析；表达量随生长情况的变化关系通过实时荧光定量PCR进行测定。结果：克隆了car-TC基因，该基因长1 784 bp，编码一个577aa的蛋白质，该蛋白质含有CCD酶活性必需的4个组氨酸残基，系统发育进化分析表明该蛋白和棒束菌、白僵菌的同源蛋白聚在同一簇，实时荧光定量PCR结果表明该蛋白的表达量随生长时间的延长而减少。结论：获得一个类胡萝卜素合成途径中的关键酶——双加氧裂解酶基因car-TC，该基因的表达主要受时序调控，随生活周期的进行有逐渐降低的趋势。